Виявлення та ідентифікація Pasteurella spp. у собак з використанням бронхоальвеолярного лаважу та молекулярного методу дослідження
DOI:
https://doi.org/10.31210/spi2025.28.04.33Ключові слова:
бронхоальвеолярний лаваж, ПЛР, Pasteurella canis, Pasteurella stomatis, собакаАнотація
У роботі наведено результати досліджень щодо виявлення та ідентифікації Pasteurella spp. за респіраторних захворювань собак. Представлено дані щодо змін у показниках крові хворих тварин, висвітлено дані щодо цитологічного та протеїнового складу рідини, отриманої за допомогою техніки бронхоальвеолярного лаважу (БАЛ), а також результатів полімеразної ланцюгової реакції з метою встановлення видової належності збудників роду Pasteurella. Виконання досліджень проводили упродовж періоду з вересня 2021 року по грудень 2022 року. У цей період досліджено 57 собак різного віку та статі з ознаками респіраторних захворювань. Із загальної кількості досліджених тварин у 22 собак виявлено наявність збудників роду Pasteurella. Аналізуючи показники крові від тварин, що виявилися інфікованими Pasteurella spp., виявлено вірогідне (P≤0,01) збільшення як загальної кількості лейкоцитів (у 2,2 раза), так і окремих форм лейкоцитів. Зокрема, кількості нейтрофілів – у 1,9 раза (P≤0,01), еозинофілів – у 1,7 раза (P≤0,01) та лімфоцитів – у 3,8 раза (P≤0,01) порівняно з аналогічними показниками у клінічно здорових собак. На фоні виявлених змін у кількісному складі лейкоцитів у хворих собак встановлено протеїнемію, де вміст загального білку порівняно з клінічно здоровими тваринами був нижче у 1,3 раза (P≤0,01). Аналізуючи показники цитологічного дослідження рідини, отриманої за допомогою техніки БАЛ, встановлено значні відмінності в клітинному складі бронхоальвеолярної рідини клінічно здорових собак та собак інфікованих Pasteurella spp. Зокрема, в рідині хворих тварин виявлено вірогідно (P≤0,01) більшу кількість нейтрофілів, еозинофілів, лімфоцитів, епітеліальних та бактеріальних клітин (у 3,5, 45, 2,8, 2,2 та 12,0 раза) порівняно з показниками у клінічно здорових собак. Також в рідині, отриманій за допомогою БАЛ, у собак інфікованих Pasteurella spp. виявили збільшення кількості (у 2,6 раза, P≤0,01) клітин з ядром порівняно з клінічно здоровими собаками. Застосування бактеріологічного дослідження та молекулярного тестування з використанням ПЛР дали змогу виділити та ідентифікувати до виду Pasteurella canis (17 зразків / 29,82 %) та Pasteurella stomatis (5 зразків / 8,77 %).
Посилання
Kokotovic, B., Friis, N. F., & Ahrens, P. (2007). Mycoplasma alkalescens demonstrated in bronchoalveolar lavage of cattle in Denmark. Acta Veterinaria Scandinavica, 49 (1), 2. https://doi.org/10.1186/1751-0147-49-2
Songer, J. G., & Post, K. W. (2005). The genera Mannheimia and Pasteurella. In: L. Duncan (Editor) Veterinary microbiology: bacterial and fungal agents of animal disease (pp. 81–190). St. Louis, MO: Elsevier Saunders.
Scharmann, W., & Heller, A. (2001). Survival and transmissibility of Pasteurella pneumotropica. Laboratory Animals, 35 (2), 163–166. https://doi.org/10.1258/0023677011911543
Sykes, J. E. (2010). Immunodeficiencies caused by infectious diseases. Veterinary Clinics of North America: Small Animal Practice, 40 (3), 409–423. https://doi.org/10.1016/j.cvsm.2010.01.006
Azizollah, E., Bentol-hoda, M., & Razieh, K. (2009). The aerobic bacterial population of the respiratory passageways of healthy dromedaries in Najaf Abbad abattoir, Central Iran. Journal of Camelid Science, 2, 26–29.
Padrid, P. A. (2011). Laryngoscopy and tracheobronchoscopy of the dog and cat. In: T. R. Tams & C. A. Rawlings (eds). Small Animal Endoscopy (pp. 331–359. St. Louis, MI: Elsevier Mosby https://doi.org/10.1016/b978-0-323-05578-9.10010-5
Hawkins, E. C., DeNicola, D. B., & Kuehn, N. F. (1990). Bronchoalveolar lavage in the evaluation of pulmonary disease in the dog and cat. Journal of Veterinary Internal Medicine, 4 (5), 267–274. https://doi.org/10.1111/j.1939-1676.1990.tb03120.x
Hawkins, E. (2004). Bronchoalveolar lavage. In: L. G. King (ed.) Textbook of respiratory disease in dogs and cats (pp. 118–128). https://doi.org/10.1016/b978-0-7216-8706-3.50021-9
Miller, C. J. (2007). Approach to the respiratory patient. Veterinary Clinics of North America: Small Animal Practice, 37 (5), 861–878. https://doi.org/10.1016/j.cvsm.2007.05.014
Creevy, K. E. (2009). Airway evaluation and flexible endoscopic procedures in dogs and cats: Laryngoscopy, transtracheal wash, tracheobronchoscopy, and bronchoalveolar lavage. Veterinary Clinics of North America: Small Animal Practice, 39 (5), 869–880. https://doi.org/10.1016/j.cvsm.2009.05.001
Silverstein, D. C., & Drobratz, K. J. (2010). Clinical evaluation of the respiratory tract. In: S. J. Ettinger & E. C. Feldman (eds.). Textbook of veterinary internal medicine. 7th ed. (pp. 1055–1066). St Louis: Saunders Elsevier.
Hawkins, E. C., Rogala, A. R., Large, E. E., Bradley, J. M., & Grindem, C. B. (2006). Cellular composition of bronchial brushings obtained from healthy dogs and dogs with chronic cough and cytologic composition of bronchoalveolar lavage fluid obtained from dogs with chronic cough. American Journal of Veterinary Research, 67 (1), 160–167. https://doi.org/10.2460/ajvr.67.1.160
Johnson, L. R., Queen, E. V., Vernau, W., Sykes, J. E., & Byrne, B. A. (2013). Microbiologic and cytologic assessment of bronchoalveolar lavage fluid from dogs with lower respiratory tract infection: 105 cases (2001–2011). Journal of Veterinary Internal Medicine, 27 (2), 259–267. https://doi.org/10.1111/jvim.12037
Johnson, L. R., Johnson, E. G., Hulsebosch, S. E., Dear, J. D., & Vernau, W. (2019). Eosinophilic bronchitis, eosinophilic granuloma, and eosinophilic bronchopneumopathy in 75 dogs (2006-2016). Journal of Veterinary Internal Medicine, 33 (5), 2217–2226. https://doi.org/10.1111/jvim.15605
Sellyei, B., Wehmann, E., Makrai, L., & Magyar, T. (2010). Characterisation of Pasteurella dagmatis-like isolates recovered from the feline oral cavity. Veterinary Microbiology, 145 (3–4), 279–285. https://doi.org/10.1016/j.vetmic.2010.03.022
Hussein, S. A., & Hamad, M. A. (2022). Mycoplasma from the upper respiratory tract and conjunctival infections in household dogs. Iraqi Journal of Veterinary Sciences, 36 (Supplement I), 137–141. https://doi.org/10.33899/ijvs.2022.135824.2525
H. Al-Hyani, O. (2011). A comparative study for lung biopsy in dogs. Iraqi Journal of Veterinary Sciences, 25 (1), 35–40. https://doi.org/10.33899/ijvs.2011.5701
Saaed, M. M., & Alsarhan, Q. T. (2022). Detection of canine distemper virus in stray and pet dogs in Mosul city, Iraq. Iraqi Journal of Veterinary Sciences, 36 (2), 315–319. https://doi.org/10.33899/ijvs.2021.130127.1739
Król, J., Bania, J., Florek, M., Pliszczak-Król, A., & Staroniewicz, Z. (2011). Polymerase chain reaction–based identification of clinically relevant Pasteurellaceae isolated from cats and dogs in Poland. Journal of Veterinary Diagnostic Investigation, 23 (3), 532–537. https://doi.org/10.1177/1040638711403434
Al-Mohammed, N. T., Al-Rawi, Kh. M., Khames, M. A., & Al-Marani, W. Kh. (1986). Principles of statistics. Baghdad: Ministry of higher education and scientific research. Baghdad university.
Woods, K. S., Defarges, A. M. N., Abrams-Ogg, A. C. G., Dobson, H., Brisson, B. A., Viel, L., & Bienzle, D. (2014). Comparison of bronchoalveolar lavage fluid obtained by manual aspiration with a handheld syringe with that obtained by automated suction pump aspiration from healthy dogs. American Journal of Veterinary Research, 75 (1), 85–90. https://doi.org/10.2460/ajvr.75.1.85
Mitchell, J. A., Cardwell, J. M., Renshaw, R. W., Dubovi, E. J., & Brownlie, J. (2013). Detection of canine pneumovirus in dogs with canine infectious respiratory disease. Journal of Clinical Microbiology, 51 (12), 4112–4119. https://doi.org/10.1128/jcm.02312-13
Dear, J. D. (2020). Bacterial pneumonia in dogs and cats. Veterinary Clinics of North America: Small Animal Practice, 50 (2), 447–465. https://doi.org/10.1016/j.cvsm.2019.10.007
Ayodhya, S., Rao, D. T., Reddy, Y. N., Sundar, N. S., & Kumar, V. G. (2013). Epidemiological, clinical and haematological studies on canine respiratory diseases in and around Hyderabad city andhra Pradesh, India. International Journal of Current Microbiology and Applied Sciences, 2 (11), 453–462.
Kaur, J., & Singh, S. (2022). Respiratory diseases and their diagnosis in dogs: A review. Indian Journal of Animal Research. https://doi.org/10.18805/ijar.b-4994
Piva, S., Zanoni, R. G., Specchi, S., Brunetti, B., Florio, D., & Pietra, M. (2010). Chronic rhinitis due to Streptococcus equi subspecies zooepidemicus in a dog. Veterinary Record, 167 (5), 177–178. Portico. https://doi.org/10.1136/vr.c3607
Anusz, K. (2005). Some respiratory diseases in ageing dogs. Weterynaria Praktyce, 2, 14–17.
Amrute, P. K., Muley, V. D., Dighe, D. G., Velhankar, R. D., & Keskar, D. V. (2009).Chronic bronchopneumonia in Great Dane pup at Mumbai. Veterinary World, 2, 358–359.
Ji, S. Y., Yi, K. J., Kim, J. Y., Yoon, J. H., & Choi, M. C. (2012). Imaging features of eosinophilic bronchopneumopathy in three dogs. Journal of Veterinary Clinics, 29 (2), 194–197.
Ratjen, F., Costabel, U., Griese, M., & Paul, K. (2003). Bronchoalveolar lavage fluid findings in children with hypersensitivity pneumonitis. European Respiratory Journal, 21 (1), 144–148. https://doi.org/10.1183/09031936.03.00035703a
Johnson, L. R., & Vernau, W. (2019). Bronchoalveolar lavage fluid lymphocytosis in 104 dogs (2006-2016). Journal of Veterinary Internal Medicine, 33 (3), 1315–1321. https://doi.org/10.1111/jvim.15489
Boothe, D. (2004). Drugs affecting the respiratory system. In: L. G. King (ed.) Textbook of respiratory disease in dogs and cats. (pp. 229–252). St Louis: Saunders Elsevier. https://doi.org/10.1016/b978-0-7216-8706-3.50036-0
Byrne, A. J., Mathie, S. A., Gregory, L. G., & Lloyd, C. M. (2015). Pulmonary macrophages: key players in the innate defence of the airways. Thorax, 70 (12), 1189–1196. https://doi.org/10.1136/thoraxjnl-2015-207020
Hostetter, S. J., Clark, S. K., Gilbertie, J. M., Wiechert, S. A., Jones, D. E., & Sponseller, B. A. (2017). Age‐related variation in the cellular composition of equine bronchoalveolar lavage fluid. Veterinary Clinical Pathology, 46 (2), 344–353. https://doi.org/10.1111/vcp.12473
Viitanen, S. J., Lappalainen, A., & Rajamäki, M. M. (2015). Co-infections with respiratory viruses in dogs with bacterial pneumonia. Journal of Veterinary Internal Medicine, 29 (2), 544–551. https://doi.org/10.1111/jvim.12553
Di Terlizzi, R., English, K., Cowell, R. L., Tyler, R. D., & Meinkoth, J. H. (2020). Transtracheal and bronchoalveolar washes. In: A. C. Valenciano & R. L. Cowell (eds.). Cowell and Tyler’s Diagnostic Cytology and Hematology of the Dog and Cat. 5th ed. (pp. 247–268). St. Louis, Missouri: Mosby Elsevier https://doi.org/10.1016/b978-0-323-53314-0.00016-x
Carter, G. R., & Wise, D. J. (2004). Essentials of Veterinary Bacteriology and Mycology, 6th Edition. Iowa: Iowa State Press.
Quinn, P. J., Carter, M. E., Markey, B. K., & Carter, C. R. (2004). Veterinary Clinical Microbiology. 6th edition. London: Wolfe Publishing.
Mutters, R., Christensen, H., & Bisgaard, M. (2015). Pasteurella. Bergey’s Manual of Systematics of Archaea and Bacteria, 1–23. https://doi.org/10.1002/9781118960608.gbm01201
Rajeev, R., Panda, S. K., Acharya, A. P., Singh, A. P., & Gupta, M. K. (2011). Molecular diagnosis of haemorrhagic septicaemia - a review. Veterinary World, 4 (4), 189–192. https://doi.org/10.5455/vetworld.2011.189-192
Kumar, R., Chahar, A., & Fakhruddin. (2017). Isolation, biochemical characterization and therapeutic management of pasturellosis in buffaloes. Intas Polivet, 18 (1), 43.
Hunt Gerardo, S., Citron, D. M., Claros, M. C., Fernandez, H. T., & Goldstein, E. J. C. (2001). Pasteurella multocida subsp. multocida and P. multocida subsp. septica differentiation by PCR fingerprinting and α-Glucosidase activity. Journal of Clinical Microbiology, 39 (7), 2558–2564. https://doi.org/10.1128/jcm.39.7.2558-2564.2001
Đurđa, S., & Murray H. (2020). Pasteurella spp. infections of the lower respiratory tract in dogs and cat. Animal Health Laboratory, 24 (4), 20.
Hara, J., Fujimura, M., Ueda, A., Myou, S., Oribe, Y., Ohkura, N., Kita, T., Yasui, M., & Kasahara, K. (2008). Effect of pressure stress applied to the airway on cough-reflex sensitivity in guinea pigs. American Journal of Respiratory and Critical Care Medicine, 177 (6), 585–592. https://doi.org/10.1164/rccm.200703-457oc
Downloads
Опубліковано
Як цитувати
Номер
Розділ
Ліцензія
Авторське право (c) 2025 Scientific Progress & Innovations
Ця робота ліцензується відповідно до Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Creative Commons Attribution 4.0 International Licens